1.儀器介紹
Fragment Analyzer^TM全自動毛細管電泳系統(tǒng)是基于熒光檢測技術和毛細管電泳技術發(fā)展而來的新型DNA/RNA片段分離儀器，它采用敏感的嵌入染料以及強大的LED光源，避免了傳統(tǒng)方法中對熒光標記引物的依賴。
DNA/RNA片段的分離是通過對毛細管列陣里填充的可導電的分離膠施加高壓電場，依據核酸片段長度不同在凝膠電泳中遷移速度不同的原理，來達到分離檢測的目的。
TILLING（Targeting Induced Local Lesions In Genomes）,即定向誘導基因組局部突變技術，是一種高通量、低成本且全新的反向遺傳學研究方法。TILLING技術借助高通量的檢測手段，可快速有 效從化學誘變劑處理的突變群體中進行點突變鑒定、突變體鑒定和突變表型鑒定以及SNP檢測等。傳統(tǒng)的未知突變檢測是一個挑戰(zhàn)且費時費力的過程。由美國 AATI公司研發(fā)改進的TILLING流程省去熒光標記引物的使用和樣品的清洗環(huán)節(jié)，大大縮短檢測時間和人工操作步驟，使得突變檢測更加快速、更加容易。
目前，F(xiàn)ragment AnalyzerTM全自動突變檢測系統(tǒng)已成功應用于水稻、玉米、小麥、萵苣、西紅柿、大豆的反向遺傳學TILLING研究中。
2.Fragment Analyzer^TM系統(tǒng)Tilling分析優(yōu)勢

● 全自動 分離膠和樣品自動上樣，無需手動灌膠，避免交叉污染
● 高通量 可一次檢測12或96個樣品，多為288個樣品
● 高分辨 分辨率為2bp
● 高靈敏 檢測低濃度可達5pg/ul
● 運行快 15min內完成700bp片段分離
● 成本低 無需芯片，毛細管可反復利用
● 易操作 PROSize2.0軟件直觀顯示分析結果
● 用途廣 可分析片段范圍為35-40000bp
● 更靈活 可提供12和96兩種型號的毛細管列陣
3.Fragment Analyzer^TM在TILLING平臺的應用

• 點突變鑒定；突變體鑒定；突變表型鑒定；突變特性研究
• SNP檢測和發(fā)掘；
• 自然資源評價；
• 作物品種改良；
• 創(chuàng)造突變資源；
• 功能基因組學研究

4.與傳統(tǒng)DNA突變檢測技術相比，F(xiàn)ragment Analyzer^TM優(yōu)勢

1)不需要標記的引物

2)省去脫鹽清除步驟
3)分析片段長度可達2kbp以上，可達40k

4)可同時分析8個不同的DNA樣本組成的DNA池

5)電泳時間短
6)PRO Size™ 軟件全自動突變檢測